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Schon um 20:15 Uhr erreichte die Serie im Schnitt 4,70 Millionen Zuschauer ab drei Jahren sowie einen damit verbundenen Marktanteil in Höhe von 19,1 Prozent beim Gesamtpublikum. Auch in der Gruppe der 14- bis 49-Jährigen stieß «Der letzte Zeuge» auf großes Interesse: Mit 750.000 Zuschauern dieser Altersklasse und 9,1 Prozent Marktanteil lag die Krimi-Reihe über dem ZDF-Schnitt. Die zweite Folge brachte es im Anschluss sogar auf exakt eine Million junge Zuschauer sowie 11,1 Prozent.
Noch besser sah es insgesamt aus: 5,32 Millionen Zuschauer nahmen Abschied von Ulrich Mühe, der Marktanteil betrug 20,6 Prozent. Mühe spielte seit 1998 die Hauptrolle des Gerichtsmediziners Dr. Robert Kolmaar in der preisgekrönten ZDF-Serie.